Beschränkungen, Gefahren und Komplikationen der Zelltransplantation

Die regenerative plastische Medizin basiert auf der klinischen Umsetzung der toti- und pluripotenten Eigenschaften embryonaler und progenitorischer Stammzellen, die in vitro und in vivo die Schaffung spezifischer Zelllinien ermöglichen, die beschädigte Gewebe und Organe einer kranken Person neu besiedeln.

Die reale Möglichkeit, embryonale Stammzellen und Stammzellen aus definitivem Gewebe (die sogenannten „adulten“ Stammzellen) des Menschen zu therapeutischen Zwecken zu verwenden, steht außer Frage. Experten der National Medical Academy of the United States (Stammzellen und die Zukunft der regenerativen Medizin, National Academy Press) und des National Institute of Health of the United States (Stammzellen und die zukünftigen Forschungsrichtungen, Nat. Inst. of Health USA) empfehlen jedoch eine detailliertere Untersuchung der Eigenschaften von Stammzellen in Experimenten an geeigneten biologischen Modellen und eine objektive Bewertung aller Folgen einer Transplantation. Erst dann sollten Stammzellen in der Klinik eingesetzt werden.

Es ist erwiesen, dass Stammzellen zu den Gewebederivaten aller drei Keimblätter gehören. Stammzellen kommen in der Netzhaut, Hornhaut, Epidermis, im Knochenmark und peripheren Blut, in Blutgefäßen, im Zahnmark, in der Niere, im Magen-Darm-Epithel, der Bauchspeicheldrüse und der Leber vor. Mithilfe moderner Methoden wurde nachgewiesen, dass neurale Stammzellen im Gehirn und Rückenmark eines Erwachsenen lokalisiert sind. Diese sensationellen Daten erregten die besondere Aufmerksamkeit von Wissenschaftlern und Medien, da Neuronen im Gehirn als klassisches Beispiel für eine statische Zellpopulation dienten, die sich nicht regeneriert. Sowohl in der frühen als auch in der späten Phase der Ontogenese werden im Gehirn von Tieren und Menschen aufgrund neuraler Stammzellen Neuronen, Astrozyten und Oligodendrozyten gebildet (Stammzellen: wissenschaftlicher Fortschritt und zukünftige Forschungsrichtungen. Nat. Inst. of Health USA).

Unter normalen Bedingungen manifestiert sich die Plastizität von Stammzellen definitiven Gewebes jedoch nicht. Um das plastische Potenzial von Stammzellen definitiven Gewebes auszuschöpfen, müssen diese isoliert und anschließend in Medien mit Zytokinen (LIF, EGF, FGF) kultiviert werden. Darüber hinaus nisten sich Stammzellderivate nur dann erfolgreich ein, wenn sie in den Körper eines Tieres mit geschwächtem Immunsystem (γ-Bestrahlung, Zytostatika, Busulfan usw.) transplantiert werden. Bisher liegen keine überzeugenden Beweise für die Implementierung der Stammzellplastizität bei Tieren vor, die keiner Strahlung oder anderen Effekten ausgesetzt waren, die eine tiefe Immunsuppression verursachen.

Unter solchen Bedingungen zeigt sich das gefährliche Potenzial von embryonalen Stammzellen vor allem bei ihrer Transplantation in ektopische Bereiche – bei der subkutanen Injektion von embryonalen Stammzellen in immundefiziente Mäuse bilden sich an der Injektionsstelle Teratokarzinome. Zudem treten während der Entwicklung des menschlichen Embryos häufiger Chromosomenanomalien auf als in der Embryogenese bei Tieren. Im Blastozystenstadium bestehen nur 20–25 % der menschlichen Embryonen aus Zellen mit normalem Karyotyp, und die überwiegende Mehrheit der frühen menschlichen Embryonen, die nach In-vitro-Fertilisation gewonnen werden, weist einen chaotischen Chromosomenmosaik auf und ist sehr häufig mit numerischen und strukturellen Abweichungen behaftet.

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Wohltuende Wirkungen von Stammzellen

Vorläufige Ergebnisse klinischer Studien bestätigen die positive Wirkung von Stammzellen auf den Patienten, es liegen jedoch noch keine Informationen über die langfristigen Auswirkungen der Zelltransplantation vor. Die Literatur war zunächst von Berichten über positive Ergebnisse der Transplantation embryonaler Gehirnfragmente bei Parkinson-Patienten geprägt. Doch dann tauchten Daten auf, die die effektive therapeutische Wirkung von embryonalem oder fötalem Nervengewebe, das in das Gehirn von Patienten transplantiert wurde, leugneten.

Mitte des 20. Jahrhunderts wurde erstmals die Wiederherstellung der Hämatopoese bei tödlich bestrahlten Tieren nach intravenöser Transfusion von Knochenmarkszellen entdeckt und 1969 führte der amerikanische Forscher D. Thomas die erste Knochenmarktransplantation beim Menschen durch. Das damals fehlende Wissen über die Mechanismen der immunologischen Inkompatibilität von Knochenmarkszellen von Spender und Empfänger führte zu einer hohen Sterblichkeit aufgrund häufiger Transplantatversagen und der Entwicklung einer Graft-versus-Host-Reaktion. Die Entdeckung des Haupthistokompatibilitätskomplexes, zu dem auch die humanen Leukozytenantigene (HbA) gehören, und die Verbesserung seiner Typisierungsmethoden ermöglichten eine deutliche Verlängerung der Überlebensrate nach Knochenmarktransplantation, was zu einer weit verbreiteten Anwendung dieser Behandlungsmethode in der Onkohämatologie führte. Ein Jahrzehnt später wurden die ersten Transplantationen von hämatopoetischen Stammzellen (HSCs) durchgeführt, die mittels Leukapherese aus peripherem Blut gewonnen wurden. 1988 wurde Nabelschnurblut in Frankreich erstmals als Quelle für HSZ zur Behandlung eines Kindes mit Fanconi-Anämie verwendet. Seit Ende 2000 erscheinen in der Presse Berichte über die Fähigkeit von HSZ, sich in Zellen verschiedener Gewebetypen zu differenzieren, was ihren klinischen Anwendungsbereich potenziell erweitert. Es stellte sich jedoch heraus, dass das Transplantatmaterial neben HSZ eine erhebliche Anzahl nicht-hämatopoetischer Zellverunreinigungen unterschiedlicher Art und Eigenschaften enthält. In diesem Zusammenhang werden Methoden zur Reinigung des Transplantats und Kriterien zur Beurteilung seiner zellulären Reinheit entwickelt. Insbesondere wird die positive Immunselektion von CD34+-Zellen verwendet, die die Isolierung von HSZ mittels monoklonaler Antikörper ermöglicht.

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Komplikationen der Stammzelltherapie

Komplikationen bei Knochenmarktransplantationen sind meist hämatologisch und mit einer lang anhaltenden iatrogenen Panzytopenie verbunden. Am häufigsten treten infektiöse Komplikationen, Anämie und Blutungen auf. In diesem Zusammenhang ist die Wahl des optimalen Verfahrens zur Knochenmarksentnahme, -verarbeitung und -lagerung für eine maximale Stammzellkonservierung äußerst wichtig, um eine schnelle und stabile Wiederherstellung der Hämatopoese zu gewährleisten. Bei der Charakterisierung eines Transplantates werden derzeit üblicherweise folgende Parameter erfasst: die Anzahl mononukleärer und/oder kernhaltiger Zellen, koloniebildender Einheiten und der Gehalt an CD34-positiven Zellen. Leider ermöglichen diese Indikatoren nur eine indirekte Bewertung der tatsächlichen hämatopoetischen Kapazität der Stammzellpopulation des Transplantates. Bislang gibt es keine absolut genauen Parameter zur Bestimmung der Eignung eines Transplantates für die langfristige Wiederherstellung der Hämatopoese bei Patienten, auch nicht bei autologer Knochenmarktransplantation. Die Entwicklung allgemeiner Kriterien ist aufgrund fehlender strenger Standards für die Verarbeitung, Kryokonservierung und Testung des Transplantates äußerst schwierig. Darüber hinaus ist es notwendig, die Vielfalt der Faktoren zu berücksichtigen, die die Parameter für eine erfolgreiche Wiederherstellung der Hämatopoese bei jedem einzelnen Patienten beeinflussen. Bei der autologen Knochenmarktransplantation sind die wichtigsten Faktoren die Anzahl der vorangegangenen Chemotherapiezyklen, die Charakteristika des Konditionierungsschemas, der Krankheitszeitraum, in dem das Knochenmark entnommen wurde, und die Schemata für den Einsatz koloniestimulierender Faktoren in der posttransplantativen Phase. Darüber hinaus darf nicht vergessen werden, dass eine der Transplantation vorausgehende Chemotherapie negative Auswirkungen auf Knochenmarkstammzellen haben kann.

Die Inzidenz schwerer toxischer Komplikationen steigt bei allogener Knochenmarktransplantation signifikant an. In diesem Zusammenhang sind statistische Daten zur allogenen Knochenmarktransplantation bei Thalassämie von Interesse. In den Berichten der European Bone Marrow Transplantation Group wurden etwa 800 Knochenmarktransplantationen an Patienten mit Thalassämie major registriert. Allogene Transplantationen bei Thalassämie werden in den allermeisten Fällen von HLA-identischen Geschwistern durchgeführt, was bei der Transplantation von Stammzellmaterial von teilweise kompatiblen verwandten oder kompatiblen nicht verwandten Spendern mit schweren Komplikationen und hoher Mortalität verbunden ist. Um das Risiko tödlicher infektiöser Komplikationen zu minimieren, werden die Patienten in isolierten aseptischen Boxen mit laminarem Luftstrom untergebracht und erhalten eine bakterienarme oder bakterienfreie Diät. Zur bakteriellen Dekontamination des Darms werden nicht resorbierbare Formen von Antibiotika und Antimykotika oral verschrieben. Zur Prophylaxe wird Amphotericin B intravenös verabreicht. Die Prävention systemischer Infektionen wird durch Amikacin und Ceftazidim verstärkt. Diese werden am Tag vor der Transplantation verschrieben und bis zur Entlassung des Patienten fortgesetzt. Alle Blutprodukte werden vor der Transfusion mit einer Dosis von 30 Gy bestrahlt. Die parenterale Ernährung während der Transplantation ist eine notwendige Voraussetzung und beginnt unmittelbar nach der natürlichen Einschränkung der Nahrungsaufnahme.

Eine Reihe von Komplikationen sind mit der hohen Toxizität von Immunsuppressiva verbunden, die oft Übelkeit, Erbrechen und Mukositis, Nierenschäden und interstitielle Pneumonie verursachen. Eine der schwerwiegendsten Komplikationen der Chemotherapie ist die venookklusive Erkrankung der Leber, die in der frühen Zeit nach der Transplantation zum Tod führt. Risikofaktoren für eine Thrombose der Venen des Pfortadersystems der Leber sind das Alter der Patienten, das Vorliegen von Hepatitis und Leberfibrose sowie eine immunsuppressive Therapie nach einer Knochenmarktransplantation. Die venookklusive Erkrankung ist besonders gefährlich bei Thalassämie, die von Hämosiderose der Leber, Hepatitis und Fibrose begleitet wird - häufigen Begleitern der Transfusionstherapie. Eine Thrombose der Venen des Pfortadersystems der Leber entwickelt sich 1-2 Wochen nach der Transplantation und ist gekennzeichnet durch einen schnellen Anstieg des Bilirubingehalts und der Transaminaseaktivität im Blut, ein Fortschreiten der Hepatomegalie, Aszites, Enzephalopathie und Schmerzen im Oberbauch. Histologisch zeigt das Autopsiematerial Endothelschäden, subendotheliale Blutungen, Schäden an zentrilobulären Hepatozyten sowie thrombotische Obstruktionen der Venolen und Zentralvenen der Leber. Bei Patienten mit Thalassämie wurden Fälle von tödlichem Herzstillstand im Zusammenhang mit der toxischen Wirkung von Zytostatika beschrieben.

In der Zeit vor der Transplantation verursachen Cyclophosphamid und Busulfan häufig eine toxisch-hämorrhagische Zystitis mit pathologischen Veränderungen der Uroepithelzellen. Die Anwendung von Cyclosporin A bei Knochenmarktransplantationen geht häufig mit Nephro- und Neurotoxizität, Hypertonie-Syndrom, Flüssigkeitsretention im Körper und Hepatozytenzytolyse einher. Sexuelle und reproduktive Funktionsstörungen treten häufiger bei Frauen auf. Bei kleinen Kindern ist die Pubertätsentwicklung nach der Transplantation in der Regel nicht beeinträchtigt, bei älteren Kindern kann die Pathologie der Entwicklung der sexuellen Sphäre jedoch sehr schwerwiegend sein – bis hin zur Sterilität. Zu den Komplikationen, die direkt mit der Transplantation selbst zusammenhängen, gehören die Abstoßung allogener Knochenmarkszellen, ABO-Inkompatibilität sowie akute und chronische Formen der Graft-versus-Host-Krankheit.

Bei Patienten mit ABO-inkompatibler Knochenmarktransplantation werden 330–605 Tage nach der Transplantation Wirt-gegen-ABO-Spender-Isoagglutinine produziert, was zu einer verlängerten Hämolyse führen und den Bedarf an Bluttransfusionen drastisch erhöhen kann. Diese Komplikation wird durch die ausschließliche Transfusion von Erythrozyten des Typs 0 verhindert. Nach der Transplantation entwickeln einige Patienten eine autoimmune Neutropenie, Thrombozytopenie oder Panzytopenie, die eine Splenektomie zur Korrektur erfordern.

Bei 35–40 % der Empfänger entwickelt sich innerhalb von 100 Tagen nach einer allogenen HLA-identischen Knochenmarktransplantation eine akute Graft-versus-Host-Krankheit. Das Ausmaß der Beteiligung von Haut, Leber und Darm variiert von Ausschlag, Durchfall und mäßiger Hyperbilirubinämie bis hin zu Hautabschuppung, Darmverschluss und akutem Leberversagen. Bei Patienten mit Thalassämie beträgt die Inzidenz einer akuten Graft-versus-Host-Krankheit Grad I nach Knochenmarktransplantation 75 %, bei Grad II und höher 11–53 %. Eine chronische Graft-versus-Host-Krankheit als systemisches Multiorgansyndrom entwickelt sich in der Regel innerhalb von 100–500 Tagen nach einer allogenen Knochenmarktransplantation bei 30–50 % der Patienten. Betroffen sind Haut, Mundhöhle, Leber, Augen, Speiseröhre und die oberen Atemwege. Man unterscheidet zwischen einer begrenzten Form der chronischen Graft-versus-Host-Krankheit, bei der Haut und/oder Leber betroffen sind, und einer ausgedehnten Form, bei der generalisierte Hautläsionen mit chronischer aggressiver Hepatitis, Läsionen der Augen, Speicheldrüsen oder anderer Organe einhergehen. Der Tod wird häufig durch infektiöse Komplikationen infolge einer schweren Immunschwäche verursacht. Bei Thalassämie tritt eine leichte Form der chronischen Graft-versus-Host-Krankheit bei 12 %, eine mittelschwere bei 3 % und eine schwere bei 0,9 % der Empfänger von allogenem HLA-kompatiblem Knochenmark auf. Eine schwere Komplikation der Knochenmarktransplantation ist die Transplantatabstoßung, die 50–130 Tage nach der Operation auftritt. Die Häufigkeit der Abstoßung hängt vom Konditionierungsschema ab. Insbesondere bei Patienten mit Thalassämie, die während der Vorbereitungsphase nur Methotrexat erhielten, wurde in 26 % der Fälle eine Abstoßung des Knochenmarktransplantats beobachtet, bei einer Kombination von Methotrexat mit Cyclosporin A – in 9 % der Fälle und bei der Gabe von nur Cyclosporin A – in 8 % der Fälle (Gaziev et al., 1995).

Infektiöse Komplikationen nach einer Knochenmarktransplantation werden durch Viren, Bakterien und Pilze verursacht. Ihre Entwicklung ist mit einer durch Chemotherapeutika während der Konditionierungsphase induzierten schweren Neutropenie, einer Schädigung der Schleimhautbarriere durch Zytostatika und der Graft-versus-Host-Reaktion verbunden. Je nach Entwicklungszeitpunkt werden drei Phasen infektiöser Komplikationen unterschieden. In der ersten Phase (entwickelt sich im ersten Monat nach der Transplantation) überwiegen Schädigungen der Schleimhautbarriere und Neutropenie, oft begleitet von Virusinfektionen (Herpes, Epstein-Barr-Virus, Cytomegalovirus, Varicella zoster) sowie Infektionen durch grampositive und gramnegative Bakterien, Candida-Pilze, Aspergillen. In der frühen Posttransplantationsphase (im zweiten und dritten Monat nach der Transplantation) ist das Cytomegalovirus die schwerste Infektion, die in der zweiten Phase infektiöser Komplikationen oft zum Tod der Patienten führt. Bei Thalassämie entwickelt sich bei 1,7–4,4 % der Empfänger nach einer Knochenmarktransplantation eine Cytomegalievirus-Infektion. Die dritte Phase tritt in der späten postoperativen Phase (drei Monate nach der Operation) auf und ist durch eine schwere kombinierte Immunschwäche gekennzeichnet. Infektionen durch Varicella zoster, Streptokokken, Pneumocystis carinii, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae und hepatotrope Viren sind in dieser Zeit häufig. Bei Thalassämie ist die Mortalität von Patienten nach einer Knochenmarktransplantation mit bakterieller und Pilzsepsis, idiopathischer interstitieller und Cytomegalievirus-Pneumonie, akutem Atemnotsyndrom, akuter Herzinsuffizienz, Herzbeuteltamponade, Hirnblutung, venookklusiver Lebererkrankung und akuter Graft-versus-Host-Krankheit verbunden.

Derzeit wurden einige Erfolge bei der Entwicklung von Methoden zur Isolierung reiner Populationen hämatopoetischer Stammzellen aus Knochenmark erzielt. Die Technik zur Gewinnung von fötalem Blut aus der Nabelschnur wurde verbessert, und es wurden Methoden zur Isolierung hämatopoetischer Zellen aus Nabelschnurblut entwickelt. In der Fachpresse wird berichtet, dass hämatopoetische Stammzellen sich vermehren können, wenn sie in Medien mit Zytokinen kultiviert werden. Durch den Einsatz speziell entwickelter Bioreaktoren zur Expansion hämatopoetischer Stammzellen erhöht sich die Biomasse der aus Knochenmark, peripherem oder Nabelschnurblut isolierten hämatopoetischen Stammzellen signifikant. Die Möglichkeit der Expansion hämatopoetischer Stammzellen ist ein wichtiger Schritt in Richtung der klinischen Entwicklung der Zelltransplantation.

Vor der In-vitro-Vermehrung hämatopoetischer Stammzellen ist es jedoch notwendig, eine homogene Population hämatopoetischer Stammzellen zu isolieren. Dies geschieht üblicherweise durch die Verwendung von Markern, die eine selektive Markierung hämatopoetischer Stammzellen mit monoklonalen Antikörpern, die kovalent an ein fluoreszierendes oder magnetisches Label gebunden sind, und deren Isolierung mithilfe eines geeigneten Zellsortierers ermöglichen. Gleichzeitig ist die Frage der phänotypischen Eigenschaften hämatopoetischer Stammzellen noch nicht endgültig geklärt. A. Petrenko und V. Grishchenko (2003) betrachten Zellen mit CD34-, AC133- und Thyl-Antigenen auf ihrer Oberfläche und ohne CD38-, HLA-DR- oder andere Differenzierungsmarker (Zellen mit dem Phänotyp CD34+Liir) als Kandidaten für hämatopoetische Stammzellen. Zu den Lineage (Lin)-Markern gehören Glycophorin A (GPA), CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19 und CD20 (Muench, 2001). Zellen mit dem Phänotyp CD34+CD45RalüW CD71low sowie dem Phänotyp CD34+Thyl+CD38low/c-kit/low gelten als vielversprechend für eine Transplantation.

Die Frage nach der für eine effektive Transplantation ausreichenden Anzahl hämatopoetischer Stammzellen bleibt weiterhin problematisch. Derzeit werden hämatopoetische Stammzellen aus Knochenmark, peripherem Blut, Nabelschnurblut und embryonaler Leber gewonnen. Die Expansion hämatopoetischer Stammzellen erfolgt durch Kultivierung in Gegenwart von Endothelzellen und hämatopoetischen Wachstumsfaktoren. Verschiedene Protokolle verwenden Myeloproteine, SCF, Erythropoietin, insulinähnliche Wachstumsfaktoren, Kortikosteroide und Östrogene zur Induktion der HSC-Proliferation. Durch die Verwendung von Zytokinkombinationen in vitro kann eine signifikante Erhöhung des HSC-Pools mit einem Peak in der Produktion am Ende der zweiten Kultivierungswoche erreicht werden.

Traditionell wird die Transplantation hämatopoetischer Stammzellen aus Nabelschnurblut hauptsächlich bei Hämoblastosen eingesetzt. Die Mindestdosis an hämatopoetischen Zellen für eine erfolgreiche Nabelschnurbluttransplantation beträgt jedoch 3,7 x 107 ^kernhaltige Zellen pro 1 kg Körpergewicht des Empfängers. Die Verwendung einer geringeren Anzahl hämatopoetischer Stammzellen aus Nabelschnurblut erhöht das Risiko eines Transplantatversagens und eines Krankheitsrückfalls erheblich. Daher wird die Transplantation hämatopoetischer Stammzellen aus Nabelschnurblut hauptsächlich zur Behandlung von Hämoblastosen bei Kindern eingesetzt.

Leider gibt es noch immer keine Standards für die Beschaffung oder standardisierte Protokolle für die klinische Verwendung hämatopoetischer Zellen aus Nabelschnurblut. Dementsprechend sind Nabelschnurblutstammzellen selbst keine gesetzlich anerkannte Quelle hämatopoetischer Zellen für Transplantationen. Darüber hinaus gibt es keine ethischen oder rechtlichen Normen, die die Aktivitäten und die Organisation der im Ausland bestehenden Nabelschnurblutbanken regeln. Für eine sichere Transplantation müssen alle Nabelschnurblutproben sorgfältig überwacht werden. Vor der Blutentnahme bei einer schwangeren Frau muss deren Zustimmung eingeholt werden. Jede schwangere Frau muss auf HBsAg-Belastung sowie das Vorhandensein von Antikörpern gegen Hepatitis C, HIV und Syphilisviren untersucht werden. Jede Nabelschnurblutprobe muss standardmäßig auf die Anzahl kernhaltiger Zellen, CD34+ und Koloniebildungsfähigkeit getestet werden. Darüber hinaus werden eine HbA-Typisierung, die Bestimmung der Blutgruppe mittels ABO und ihrer Zugehörigkeit mittels des Rhesusfaktors durchgeführt. Die notwendigen Testverfahren umfassen eine bakteriologische Kultur zur Sterilitätsprüfung, serologische Tests auf HIV-1- und HIV-2-Infektionen, HBsAg, Virushepatitis C, Cytomegalievirus-Infektion, HTLY-1 und HTLY-II, Syphilis und Toxoplasmose. Zusätzlich wird eine Polymerase-Kettenreaktion zum Nachweis von Cytomegalievirus- und HIV-Infektionen durchgeführt. Es empfiehlt sich, die Testprotokolle durch eine Analyse von Nabelschnurblut-GSCs zu ergänzen, um genetische Erkrankungen wie α-Thalassämie, Sichelzellenanämie, Adenosindeaminasemangel, Bruton-Agammaglobulinämie, Morbus Hurler und Morbus Ponter nachzuweisen.

Die nächste Phase der Vorbereitung auf die Transplantation ist die Frage der Konservierung der hämatopoetischen Stammzellen. Die gefährlichsten Verfahren für die Lebensfähigkeit der Zellen während ihrer Vorbereitung sind das Einfrieren und Auftauen. Beim Einfrieren hämatopoetischer Zellen kann ein erheblicher Teil von ihnen durch Kristallbildung zerstört werden. Spezielle Substanzen - Kryoprotektoren - werden verwendet, um den Prozentsatz des Zelltods zu reduzieren. Am häufigsten wird DMSO in einer Endkonzentration von 10 % als Kryoprotektor verwendet. DMSO in einer solchen Konzentration ist jedoch durch eine direkte zytotoxische Wirkung gekennzeichnet, die sich selbst unter Bedingungen minimaler Exposition manifestiert. Eine Verringerung der zytotoxischen Wirkung wird durch die strikte Einhaltung der Nulltemperatur des Expositionsmodus sowie die Einhaltung der Vorschriften für die Verarbeitung des Materials während und nach dem Auftauen (Schnelligkeit aller Manipulationen, Verwendung mehrerer Waschvorgänge) erreicht. DMSO-Konzentrationen von weniger als 5 % sollten nicht verwendet werden, da dies während der Gefrierperiode zu einem massiven Tod hämatopoetischer Zellen führt.

Das Vorhandensein von Erythrozytenverunreinigungen in der Suspensionsmischung hämatopoetischer Stammzellen birgt das Risiko der Entwicklung einer Inkompatibilitätsreaktion gegenüber Erythrozytenantigenen. Gleichzeitig steigt bei der Entnahme von Erythrozyten der Verlust an hämatopoetischen Zellen erheblich an. In diesem Zusammenhang wurde ein Verfahren zur unfraktionierten Isolierung hämatopoetischer Stammzellen vorgeschlagen. In diesem Fall werden eine 10%ige DMSO-Lösung und eine konstante Kühlungsrate (GS/min) auf -80 °C verwendet, um kernhaltige Zellen vor den schädlichen Auswirkungen niedriger Temperaturen zu schützen, wonach die Zellsuspension in flüssigem Stickstoff eingefroren wird. Man geht davon aus, dass diese Kryokonservierungsmethode zu einer teilweisen Lyse der Erythrozyten führt, sodass Blutproben nicht fraktioniert werden müssen. Vor der Transplantation wird die Zellsuspension aufgetaut und in einer Lösung aus menschlichem Albumin oder Blutserum von freiem Hämoglobin und DMSO gewaschen. Die Konservierung hämatopoetischer Vorläuferzellen ist bei dieser Methode zwar höher als bei der Fraktionierung von Nabelschnurblut, das Risiko von Transfusionskomplikationen durch die Transfusion ABO-inkompatibler Erythrozyten bleibt jedoch bestehen.

Die Einrichtung eines Bankensystems zur Lagerung HLA-getesteter und typisierter HSC-Proben könnte die oben genannten Probleme lösen. Dies erfordert jedoch die Entwicklung ethischer und rechtlicher Normen, die derzeit noch diskutiert werden. Vor dem Aufbau eines Bankennetzwerks müssen eine Reihe von Vorschriften und Dokumenten zur Standardisierung der Verfahren zur Entnahme, Fraktionierung, Testung und Typisierung sowie Kryokonservierung von HSC verabschiedet werden. Voraussetzung für den effektiven Betrieb von HSC-Banken ist die Einrichtung einer Computerbasis für die Interaktion mit den Registern der World Marrow Donor Association (WMDA) und des National Marrow Donor Program der Vereinigten Staaten (NMDP).

Darüber hinaus ist es notwendig, die Methoden der In-vitro-HSC-Expansion, vor allem von hämatopoetischen Zellen aus Nabelschnurblut, zu optimieren und zu standardisieren. Die Expansion von Nabelschnurblut-HSC ist notwendig, um die Anzahl potenzieller Empfänger zu erhöhen, die mit dem HLA-System kompatibel sind. Aufgrund der geringen Nabelschnurblutvolumina reicht die Anzahl der darin enthaltenen HSCs in der Regel nicht aus, um die Knochenmarkregeneration bei erwachsenen Patienten zu gewährleisten. Gleichzeitig ist für die Durchführung nicht verwandter Transplantationen der Zugriff auf eine ausreichende Anzahl typisierter HSC-Proben (10.000 bis 1.500.000 pro Empfänger) erforderlich.

Die Transplantation hämatopoetischer Stammzellen schließt die Komplikationen einer Knochenmarktransplantation nicht aus. Analysen zeigen, dass bei 23 % der Empfänger schwere Formen einer akuten Graft-versus-Host-Krankheit und bei 25 % chronische Formen auftreten. Bei onkohämatologischen Patienten kommt es im ersten Jahr nach der Nabelschnurblut-Stammzelltransplantation in 26 % der Fälle zu Rückfällen einer akuten Leukämie.

In den letzten Jahren haben sich Methoden zur Transplantation peripherer hämatopoetischer Stammzellen intensiv weiterentwickelt. Der Gehalt an HSC im peripheren Blut ist so gering (1 HSC pro 100.000 Blutzellen), dass ihre Isolierung ohne spezielle Vorbereitung keinen Sinn ergibt. Daher erhält der Spender zunächst eine medikamentöse Stimulationskur zur Freisetzung hämatopoetischer Zellen des Knochenmarks ins Blut. Zu diesem Zweck werden so wenig harmlose Medikamente wie Cyclophosphamid und der Granulozyten-Kolonie-stimulierende Faktor eingesetzt. Aber selbst nach der Mobilisierung der HSC ins periphere Blut übersteigt der Gehalt an CD34+-Zellen darin nicht 1,6 %.

Zur Mobilisierung hämatopoetischer Stammzellen in der Klinik wird am häufigsten S-SEC verwendet, das sich durch eine relativ gute Verträglichkeit auszeichnet, mit Ausnahme des fast natürlichen Auftretens von Knochenschmerzen. Es ist zu beachten, dass der Einsatz moderner Blutseparatoren eine effektive Isolierung hämatopoetischer Stammzellen ermöglicht. Unter normalen Hämatopoesebedingungen müssen jedoch mindestens 6 Eingriffe durchgeführt werden, um eine ausreichende Anzahl hämatopoetischer Stammzellen zu erhalten, deren Repopulationskapazität mit der einer Knochenmarksuspension vergleichbar ist. Für jeden dieser Eingriffe müssen 10-12 Liter Blut auf dem Separator verarbeitet werden, was Thrombozytopenie und Leukopenie verursachen kann. Das Separationsverfahren beinhaltet die Verabreichung eines Antikoagulans (Natriumcitrat) an den Spender, was jedoch eine Kontaktaktivierung der Thrombozyten während der extrakorporalen Zentrifugation nicht ausschließt. Diese Faktoren schaffen Bedingungen für die Entwicklung infektiöser und hämorrhagischer Komplikationen. Ein weiterer Nachteil der Methode ist die erhebliche Variabilität der Mobilisierungsreaktion, die eine Überwachung des HSC-Gehalts im peripheren Blut der Spender erfordert, um deren Maximalwert zu bestimmen.

Die autogene Transplantation hämatopoetischer Stammzellen schließt im Gegensatz zur allogenen Transplantation die Entwicklung einer Abstoßungsreaktion vollständig aus. Ein wesentlicher Nachteil der Autotransplantation hämatopoetischer Stammzellen, der das Indikationsspektrum einschränkt, ist jedoch die hohe Wahrscheinlichkeit einer Reinfusion leukämischer Klonzellen mit dem Transplantat. Zudem erhöht das Fehlen des immunvermittelten „Graft-versus-Tumor“-Effekts die Rückfallhäufigkeit maligner Bluterkrankungen signifikant. Daher bleibt die intensive Polychemotherapie mit Transplantation allogener Hämatopoese die einzige radikale Methode zur Eliminierung der neoplastischen klonalen Hämatopoese und zur Wiederherstellung einer normalen polyklonalen Hämatopoese bei myelodysplastischen Syndromen.

Aber auch in diesem Fall zielt die Behandlung der meisten Hämoblastosen nur darauf ab, die Überlebenszeit der Patienten zu erhöhen und ihre Lebensqualität zu verbessern. Mehreren großen Studien zufolge wird bei 40 % der onkohämatologischen Patienten ein langfristiges rezidivfreies Überleben nach Allotransplantation von HSCs erreicht. Bei Verwendung von Stammzellen eines HLA-kompatiblen Geschwisters werden die besten Ergebnisse bei jungen Patienten mit einer kurzen Krankheitsgeschichte, einer Blastenzahl von bis zu 10 % und günstiger Zytogenetik beobachtet. Leider ist die mit der Allotransplantation von HSCs bei Patienten mit myelodysplastischen Erkrankungen verbundene Mortalität nach wie vor hoch (in den meisten Berichten etwa 40 %). Die Ergebnisse der 10-jährigen Arbeit des National Bone Marrow Donor Program in den USA (510 Patienten, Durchschnittsalter – 38 Jahre) zeigen, dass das rezidivfreie Überleben für zwei Jahre 29 % beträgt Die Sterblichkeit bei der Allotransplantation von HSCs eines nicht verwandten Spenders ist jedoch extrem hoch und erreicht innerhalb von zwei Jahren 54 %. Ähnliche Ergebnisse wurden in einer europäischen Studie erzielt (118 Patienten, Durchschnittsalter 24 Jahre, zweijähriges rezidivfreies Überleben 28 %, Rezidiv 35 %, Sterblichkeit 58 %).

Während intensiver Chemotherapien mit anschließender Wiederherstellung der Hämatopoese mit allogenen hämatopoetischen Zellen treten häufig immunhämatologische Komplikationen und Transfusionskomplikationen auf. Diese sind größtenteils darauf zurückzuführen, dass menschliche Blutgruppen unabhängig von MHC-Molekülen vererbt werden. Daher können Spender und Empfänger, selbst wenn sie hinsichtlich der wichtigsten HLA-Antigene kompatibel sind, unterschiedliche Phänotypen ihrer Erythrozyten aufweisen. Man unterscheidet zwischen schwerer Inkompatibilität, wenn der Empfänger bereits Antikörper gegen die Erythrozytenantigene des Spenders besitzt, und leichter Inkompatibilität, wenn der Spender Antikörper gegen die Erythrozytenantigene des Empfängers besitzt. Fälle einer Kombination aus schwerer und leichter Inkompatibilität sind möglich.

Die Ergebnisse einer vergleichenden Analyse der klinischen Wirksamkeit der Allotransplantation von hämatopoetischen Stammzellen aus Knochenmark und Nabelschnurblut bei Hämoblastosen zeigen, dass bei Kindern nach einer Allotransplantation von hämatopoetischen Stammzellen aus Nabelschnurblut das Risiko einer Graft-versus-Host-Reaktion deutlich reduziert ist, jedoch eine längere Erholungsphase der Neutrophilen- und Thrombozytenzahl mit einer höheren Mortalitätsrate 100 Tage nach der Transplantation zu beobachten ist.

Durch die Untersuchung der Ursachen für die frühe Sterblichkeit konnten die Kontraindikationen für die allogene HSC-Transplantation geklärt werden. Zu den wichtigsten zählen:

• das Vorliegen positiver Tests auf eine Cytomegalievirus-Infektion beim Empfänger oder Spender (ohne vorbeugende Behandlung);
• akute Strahlenkrankheit;
• das Vorhandensein oder sogar der Verdacht auf das Vorhandensein einer mykotischen Infektion bei einem Patienten (ohne Durchführung einer systemischen Frühprophylaxe mit fungiziden Arzneimitteln);
• Hämoblastosen, bei denen die Patienten eine Langzeitbehandlung mit Zytostatika erhielten (aufgrund der hohen Wahrscheinlichkeit eines plötzlichen Herzstillstands und eines Multiorganversagens);
• Transplantation von HLA-nicht-identischen Spendern (ohne Prophylaxe einer akuten Graft-versus-Host-Reaktion mit Cyclosporin A);
• chronische Virushepatitis C (aufgrund des hohen Risikos, eine venöse Verschlusskrankheit der Leber zu entwickeln).

Daher kann eine HSC-Transplantation schwerwiegende Komplikationen verursachen, die oft zum Tod führen. In der frühen Phase (bis zu 100 Tage nach der Transplantation) gehören dazu infektiöse Komplikationen, akute Graft-versus-Host-Krankheit, Transplantatabstoßung (Versagen der Spender-HSCs), venookklusive Lebererkrankung sowie Gewebeschäden durch die Toxizität des Konditionierungsschemas, das durch eine hohe Umbaurate gekennzeichnet ist (Haut, Gefäßendothel, Darmepithel). Zu den Komplikationen der späten Posttransplantationsphase zählen chronische Graft-versus-Host-Krankheit, Rückfälle der Grunderkrankung, Wachstumsverzögerungen bei Kindern, Funktionsstörungen der Fortpflanzungsorgane und der Schilddrüse sowie Augenschäden.

Kürzlich ist im Zusammenhang mit Veröffentlichungen zur Plastizität von Knochenmarkszellen die Idee aufgekommen, HSCs zur Behandlung von Herzinfarkten und anderen Erkrankungen einzusetzen. Obwohl einige Tierversuche diese Möglichkeit stützen, müssen die Schlussfolgerungen zur Plastizität von Knochenmarkszellen bestätigt werden. Dieser Umstand sollte von Forschern berücksichtigt werden, die glauben, dass transplantierte menschliche Knochenmarkszellen sich leicht in Skelettmuskel-, Myokard- oder ZNS-Zellen umwandeln. Die Hypothese, dass HSCs eine natürliche zelluläre Quelle für die Regeneration dieser Organe sind, bedarf ernsthafter Beweise.

Insbesondere wurden die ersten Ergebnisse einer offenen randomisierten Studie von V. Belenkov (2003) veröffentlicht. Ihr Ziel war es, die Wirkung von C-SvK (dh die Mobilisierung autologer HSCs ins Blut) auf den klinischen, hämodynamischen und neurohumoralen Status von Patienten mit mittelschwerer bis schwerer chronischer Herzinsuffizienz zu untersuchen und ihre Sicherheit vor dem Hintergrund der Standardtherapie (Angiotensin-Converting-Enzym-Hemmer, Betablocker, Diuretika, Herzglykoside) zu bewerten. In der ersten Veröffentlichung der Studienergebnisse weisen die Autoren des Programms darauf hin, dass das einzige Argument für O-SvK die Ergebnisse der Behandlung eines Patienten sind, bei dem sich vor dem Hintergrund der Therapie mit diesem Medikament eine unbestreitbare Verbesserung aller klinischen und hämodynamischen Parameter zeigte. Die Theorie der Mobilisierung von HSC in den Blutkreislauf mit anschließender Myokardregeneration in der Postinfarktzone wurde jedoch nicht bestätigt – selbst bei einem Patienten mit positiver klinischer Dynamik zeigte die Stressechokardiographie mit Dobutamin keine Zonen lebensfähigen Myokards im Narbenbereich.

Es ist zu beachten, dass derzeit eindeutig nicht genügend Daten vorliegen, um die Zellersatztherapie für eine breite Anwendung im klinischen Alltag zu empfehlen. Gut konzipierte und qualitativ hochwertige klinische Studien sind erforderlich, um die Wirksamkeit verschiedener Optionen der regenerativen Zelltherapie zu bestimmen, Indikationen und Kontraindikationen dafür zu entwickeln und Leitlinien für die kombinierte Anwendung von regenerativ-plastischer Therapie und traditioneller chirurgischer oder konservativer Behandlung zu erarbeiten. Es gibt noch keine Antwort auf die Frage, welche bestimmte Population von Knochenmarkszellen (hämatopoetische Stammzellen oder Stromazellen) Neuronen und Kardiomyozyten hervorbringen kann, und es ist auch unklar, welche Bedingungen in vivo dazu beitragen.

In vielen Ländern wird auf diesen Gebieten gearbeitet. In der Zusammenfassung des Symposiums zum akuten Leberversagen der National Institutes of Health der USA werden neben der Lebertransplantation auch die Transplantation von xeno- oder allogenen Hepatozyten und die extrakorporale Verbindung von Bioreaktoren mit Leberzellen als vielversprechende Behandlungsmethoden erwähnt. Es gibt direkte Beweise dafür, dass nur fremde funktionell aktive Hepatozyten die Leber des Empfängers wirksam unterstützen können. Für die klinische Verwendung isolierter Hepatozyten ist es notwendig, eine Zellbank anzulegen, die die Zeit zwischen der Isolierung der Zellen und ihrer Verwendung deutlich verkürzt. Die akzeptabelste Methode zum Anlegen einer Bank isolierter Hepatozyten ist die Kryokonservierung von Leberzellen in flüssigem Stickstoff. Beim Einsatz solcher Zellen in der Klinik bei Patienten mit akutem und chronischem Leberversagen hat sich ein relativ hoher therapeutischer Effekt gezeigt.

Trotz der optimistischen und ermutigenden Ergebnisse der Leberzelltransplantation in Experimenten und der klinischen Praxis gibt es noch viele Probleme, die noch lange nicht gelöst sind. Dazu gehören eine begrenzte Anzahl geeigneter Organe zur Gewinnung isolierter Hepatozyten, unzureichend wirksame Methoden zu deren Isolierung, das Fehlen standardisierter Methoden zur Konservierung von Leberzellen, unklare Vorstellungen über die Mechanismen der Wachstums- und Proliferationsregulation transplantierter Zellen und das Fehlen geeigneter Methoden zur Beurteilung der Ansiedlung oder Abstoßung allogener Hepatozyten. Dazu gehört auch das Vorhandensein einer Transplantatimmunität bei Verwendung allogener und xenogener Zellen, die zwar geringer ist als bei der orthotopen Lebertransplantation, aber den Einsatz von Immunsuppressiva, die Verkapselung isolierter Hepatozyten oder deren spezielle Behandlung mit Enzymen erfordert. Eine Hepatozytentransplantation führt häufig zu einem Immunkonflikt zwischen Empfänger und Spender in Form einer Abstoßungsreaktion, die den Einsatz von Zytostatika erfordert. Eine Lösung für dieses Problem könnte die Verwendung polymerer mikroporöser Träger zur Isolierung von Leberzellen sein, was deren Überleben verbessern würde, da die Kapselmembran die Hepatozyten trotz Immunisierung des Wirts wirksam schützt.

Bei akutem Leberversagen ist eine solche Hepatozytentransplantation jedoch unwirksam, da die Leberzellen relativ lange brauchen, um sich in ihrer neuen Umgebung einzunisten und das Stadium optimaler Funktion zu erreichen. Eine mögliche Einschränkung ist die Gallensekretion während der ektopischen Transplantation isolierter Hepatozyten. Bei der Verwendung von Bioreaktoren stellt die Spezies-Mismatch zwischen menschlichen Proteinen und den von xenogenen Hepatozyten produzierten Proteinen eine erhebliche physiologische Barriere dar.

In der Literatur wird berichtet, dass die lokale Transplantation von Knochenmarkstromastammzellen eine effektive Korrektur von Knochendefekten ermöglicht und die Knochengeweberegeneration in diesem Fall intensiver verläuft als bei spontaner reparativer Regeneration. Mehrere präklinische Studien an experimentellen Modellen belegen überzeugend die Möglichkeit des Einsatzes von Knochenmarkstromazelltransplantaten in der Orthopädie, obwohl weitere Arbeiten zur Optimierung dieser Methoden selbst in einfachsten Fällen erforderlich sind. Insbesondere wurden noch keine optimalen Bedingungen für die Expansion osteogener Stromazellen ex vivo gefunden, und die Struktur und Zusammensetzung ihres idealen Trägers (Matrix) sind noch nicht entwickelt. Die für die volumetrische Knochenregeneration erforderliche Mindestzellzahl ist noch nicht bestimmt.

Es wurde nachgewiesen, dass mesenchymale Stammzellen transgermale Plastizität aufweisen, d. h. die Fähigkeit, sich in Zelltypen zu differenzieren, die phänotypisch nicht mit den Zellen der ursprünglichen Linie verwandt sind. Unter optimalen Kultivierungsbedingungen können polyklonale Knochenmark-Stroma-Stammzelllinien in vitro über 50 Teilungen überstehen, wodurch es möglich wird, aus 1 ml Knochenmarkaspirat Milliarden von Stromazellen zu gewinnen. Die Population mesenchymaler Stammzellen ist jedoch heterogen, was sich sowohl in der Variabilität der Koloniegrößen und den unterschiedlichen Geschwindigkeiten ihrer Entstehung als auch in der morphologischen Vielfalt der Zelltypen, von fibroblastenähnlichen spindelförmigen Zellen bis zu großen, flachen Zellen, äußert. Phänotypische Heterogenität wird bereits nach 3 Wochen Kultivierung stromaler Stammzellen beobachtet: Einige Kolonien bilden Knötchen aus Knochengewebe, andere bilden Cluster von Adipozyten und andere, seltener, bilden Inseln aus Knorpelgewebe.

Die Transplantation embryonalen Nervengewebes wurde ursprünglich zur Behandlung degenerativer Erkrankungen des Zentralnervensystems eingesetzt. In den letzten Jahren wurden anstelle von embryonalem Hirngewebe zelluläre Elemente von Neurosphären transplantiert, die aus neuronalen Stammzellen gewonnen wurden (Poltavtseva, 2001). Neurosphären enthalten definierte Vorläufer von Neuronen und Neuroglia, was Hoffnung auf die Wiederherstellung verlorener Hirnfunktionen nach ihrer Transplantation weckt. Nach der Transplantation verstreuter Neurosphärenzellen in die Striatumregion des Rattenhirns wurde deren Proliferation und Differenzierung in dopaminerge Neuronen beobachtet, wodurch die motorische Asymmetrie bei Ratten mit experimentellem Hemiparkinsonismus behoben wurde. In einigen Fällen entwickelten sich jedoch Tumoren aus Neurosphärenzellen, die zum Tod der Tiere führten (Bjorklund, 2002).

In der Klinik führten sorgfältige Untersuchungen an zwei Patientengruppen, bei denen weder die Patienten noch die sie beobachtenden Ärzte wussten (Doppelblindstudie), dass einer Patientengruppe embryonales Gewebe mit dopaminproduzierenden Neuronen transplantiert worden war und die zweite Patientengruppe einer Scheinoperation unterzogen wurde, zu unerwarteten Ergebnissen. Patienten mit transplantiertem embryonalem Nervengewebe fühlten sich nicht besser als die Kontrollgruppe. Darüber hinaus entwickelten fünf von 33 Patienten zwei Jahre nach der Transplantation des embryonalen Nervengewebes eine anhaltende Dyskinesie, die bei Patienten der Kontrollgruppe nicht auftrat (Stammzellen: wissenschaftlicher Fortschritt und zukünftige Forschungsrichtungen. Nat. Inst. of Health, USA). Eines der ungelösten Probleme der klinischen Forschung an neuronalen Stammzellen des Gehirns bleibt die Analyse der tatsächlichen Aussichten und Grenzen der Transplantation ihrer Derivate zur Korrektur von ZNS-Erkrankungen. Es ist möglich, dass die durch anhaltende Anfallsaktivität induzierte Neuronogenese im Hippocampus, die zu dessen struktureller und funktioneller Reorganisation führt, ein Faktor für die fortschreitende Entwicklung von Epilepsie ist. Diese Schlussfolgerung verdient besondere Aufmerksamkeit, da sie auf mögliche negative Folgen der Entstehung neuer Neuronen im reifen Gehirn und der dadurch hervorgerufenen abweichenden synaptischen Verbindungen hinweist.

Es sollte nicht vergessen werden, dass die Kultivierung in Medien mit Zytokinen (Mitogenen) die Eigenschaften von Stammzellen denen von Tumorzellen näher bringt, da bei ihnen ähnliche Veränderungen in der Regulation der Zellzyklen auftreten, die die Fähigkeit zur unbegrenzten Teilung bestimmen. Es ist leichtsinnig, frühe Derivate embryonaler Stammzellen in einen Menschen zu transplantieren, da in diesem Fall die Gefahr der Entwicklung bösartiger Neubildungen sehr hoch ist. Es ist viel sicherer, ihre stärker differenzierten Nachkommen, d. h. Vorläuferzellen differenzierter Linien, zu verwenden. Derzeit gibt es jedoch noch keine zuverlässige Technik zur Gewinnung stabiler Linien menschlicher Zellen, die sich in die gewünschte Richtung differenzieren.

Der Einsatz molekularbiologischer Technologien zur Korrektur von Erbkrankheiten und menschlichen Erkrankungen durch die Modifizierung von Stammzellen ist für die praktische Medizin von großem Interesse. Die Eigenschaften des Stammzellgenoms ermöglichen die Entwicklung einzigartiger Transplantationsschemata zur Korrektur genetischer Erkrankungen. Allerdings gibt es in diesem Bereich eine Reihe von Einschränkungen, die vor der praktischen Anwendung der Stammzellgentechnik überwunden werden müssen. Zunächst ist es notwendig, den Prozess der ex vivo Stammzellgenommodifikation zu optimieren. Es ist bekannt, dass eine langfristige (3-4 Wochen) Proliferation von Stammzellen deren Transfektion reduziert, sodass mehrere Transfektionszyklen notwendig sind, um ein hohes Maß ihrer genetischen Modifikation zu erreichen. Das Hauptproblem ist jedoch die Dauer der therapeutischen Genexpression. Bisher hat keine Studie gezeigt, dass die Dauer der effektiven Expression nach der Transplantation modifizierter Zellen vier Monate überschritten hat. In 100 % der Fälle nimmt die Expression transfizierter Gene mit der Zeit aufgrund der Inaktivierung von Promotoren und/oder des Todes von Zellen mit modifiziertem Genom ab.

Ein wichtiges Thema sind die Kosten des Einsatzes von Zelltechnologien in der Medizin. So beträgt beispielsweise der geschätzte jährliche Finanzierungsbedarf allein für die medizinischen Ausgaben einer Knochenmarktransplantationsstation, die auf 50 Transplantationen pro Jahr ausgelegt ist, etwa 900.000 US-Dollar.

Die Entwicklung von Zelltechnologien in der klinischen Medizin ist ein komplexer und mehrstufiger Prozess, der eine konstruktive Zusammenarbeit zwischen multidisziplinären wissenschaftlichen und klinischen Zentren und der internationalen Gemeinschaft erfordert. Gleichzeitig erfordern Fragen der wissenschaftlichen Organisation der Forschung im Bereich der Zelltherapie besondere Aufmerksamkeit. Die wichtigsten davon sind die Entwicklung klinischer Forschungsprotokolle, die Kontrolle der Zuverlässigkeit klinischer Daten, die Einrichtung eines nationalen Studienregisters, die Integration in internationale Programme multizentrischer klinischer Studien und die Umsetzung der Ergebnisse in die klinische Praxis.

Zum Abschluss der Einführung in die Probleme der Zelltransplantation möchte ich die Hoffnung zum Ausdruck bringen, dass die Bündelung der Bemühungen führender ukrainischer Spezialisten aus verschiedenen Wissenschaftsbereichen zu bedeutenden Fortschritten in der experimentellen und klinischen Forschung führen wird und es in den kommenden Jahren möglich sein wird, wirksame Wege zu finden, um schwerkranken Menschen, die auf Organ-, Gewebe- und Zelltransplantationen angewiesen sind, Hilfe zukommen zu lassen.

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