Bluttest auf das Epstein-Barr-Virus für Antikörper und PCR: wie man besteht, Normen

Unter Herpes verstehen wir normalerweise unansehnliche, schmerzhafte, blasenbildende Ausschläge im Gesicht und im Lippenbereich, die anschließend braune Krusten bilden. Leider ist dies nur eine der Erscheinungsformen des Herpesvirus, das beim Menschen in 8 Formen auftreten kann. Was wir üblicherweise als Herpes bezeichnen, ist das Typ-1-Virus oder Herpes-simplex-Virus. Das Typ-2-Virus verursacht Herpes genitalis, Typ 3 – „Windpocken“ und Gürtelrose, Typ 4 – infektiöse Mononukleose und mehrere andere ziemlich gefährliche Krankheiten usw. Diese Liste ließe sich fortsetzen, aber wir konzentrieren uns auf das Herpesvirus Typ 4, das auch als Epstein-Barr-Virus bezeichnet wird. Versuchen wir herauszufinden, was das Herpesvirus Typ 4 ist, warum es gefährlich ist, wann und warum ein Epstein-Barr-Virus-Test durchgeführt wird und was die Ergebnisse von Labortests aussagen.

Was ist Herpesvirus Typ 4?

Herpesvirus Typ 4, eine Variante der Herpesvirus-Infektion, wurde vor 53 Jahren vom englischen Virologen Michael Epstein beschrieben. Bei seiner Arbeit an dem Projekt wurde der Professor von seiner Doktorandin Yvonne Barr unterstützt. Diesen Personen verdankt das Virus seinen Namen. 15 Jahre nach seiner Entdeckung wurde sein wissenschaftlicher Name jedoch in Humanes Herpesvirus 4 geändert, und vor einem Jahr wurde das Virus als Humanes Gammavirus Typ 4 bezeichnet.

Doch was ist das Epstein-Barr-Virus? Wie jedes andere Virus besteht das Virion (Viruspartikel) des Herpesvirus Typ 4 aus genetischem Material (in diesem Fall doppelsträngiger DNA) und einer es umgebenden Proteinhülle (Kapsid). Zusätzlich ist das Virus von einer Membran umgeben, die ihm das Eindringen in die Zellen des Wirtes erleichtert.

Jedes Virus ist eine nicht-zelluläre Form, die ein Infektionsfaktor ist und sich außerhalb der Zellen eines lebenden Organismus nicht entwickeln und vermehren kann. Als bevorzugter Lebensraum des Herpesvirus Typ 4 gelten die Epithelzellen des Nasopharynx. Auch Leukozyten werden von ihnen nicht verschmäht, sondern sie bevorzugen eine ihrer Varianten, die sogenannten B-Lymphozyten. Es sind B-Zellen, die aktiv an der körpereigenen Immunabwehr beteiligt sind. Bei Kontakt mit einem Antigen, in unserem Fall dem Herpesvirus Typ 4 (bzw. dessen Antigenen), produzieren B-Lymphozyten Antikörper (Immunglobulinproteine). Diese können im Blut des Patienten durch eine Analyse auf das Epstein-Barr-Virus (EBV) nachgewiesen werden.

Das Herpesvirus Typ 4 verfügt über 4 Antigene, die in einer streng definierten Reihenfolge auftreten:

• EA ist ein frühes Antigen, das im Anfangsstadium der Krankheit auftritt, wenn sich Viruspartikel im Synthesestadium befinden (primäre akute Infektion oder Reaktivierung eines latenten Virus bei verminderter Immunität).
• VCA ist ein Kapsidantigen, das in der Proteinhülle enthalten ist und ebenfalls zu den frühen Antigenen gehört, da sich die Krankheit in diesem Zeitraum klinisch möglicherweise noch nicht manifestiert.
• MA – Membranantigen, tritt auf, wenn das Virion bereits gebildet ist,
• EBNA – Nukleäres (Polypeptid- oder Kern-)Antigen – ist eines der späten Antigene, Antikörper gegen das auch mehrere Monate nach der Erkrankung noch nachweisbar sind und lebenslang im Blut verbleiben.

Das Herpesvirus Typ 4 ist äußerst heimtückisch. Da das Virus außerhalb eines lebenden Organismus inaktiv ist, kann es nur von einer Person übertragen werden, die die Infektion selbst verursacht. Dabei ist es nicht unbedingt erforderlich, dass die Person alle Krankheitssymptome aufweist; die Infektion kann latent sein und sich als gewöhnliche Müdigkeit tarnen. Beispielsweise wird das chronische Erschöpfungssyndrom in den meisten Fällen mit dem Epstein-Barr-Virus in Verbindung gebracht.

Einzelne Virionen finden sich in Blut, Speichel, Sperma, Vaginalsekret und im Gewebe verschiedener Organe. Viruspartikel können zusammen mit Speichel und Blut in Gegenstände in unserer Umgebung gelangen und dort inaktiv bleiben, bis sie in den menschlichen Körper gelangen. In den allermeisten Fällen erfolgt die Infektion durch Tröpfchen in der Luft oder durch Körperkontakt (z. B. durch Küssen). Möglich sind aber auch eine intrauterine Übertragung des Virus von der Mutter auf den Fötus, eine Infektion während einer Bluttransfusion (sofern das Spenderblut Virusvirionen enthielt) und sexueller Kontakt.

Nachdem die Krankheit in den Körper eingedrungen ist und in die Zellstrukturen eingedrungen ist, kann es 5 bis 50 Tage dauern, bis sie sich bemerkbar macht. Es kann aber auch sein, dass sie sich nicht bemerkbar macht und latent verläuft, wie es in den meisten Fällen der Fall ist.

Ja, laut Studien haben etwa 90 % der erwachsenen Bevölkerung mindestens einmal im Leben eine EBV-bedingte Herpesinfektion durchgemacht. Die meisten Menschen wissen es nicht einmal, da ihr Körper den Virusangriff abwehren kann. Dies ist jedoch nicht immer der Fall.

Wie äußert sich das Epstein-Barr-Virus?

Am häufigsten haben Ärzte in ihrer Praxis mit folgenden Formen der Herpesvirusinfektion Typ 4 zu tun:

• Chronische Form (tritt nach der akuten Phase der Krankheit auf, weist einige allgemeine Krankheitssymptome auf),
• Latente oder versteckte Form (es gibt keine Symptome, aber das Virus bleibt aktiv und wird in die Umwelt freigesetzt),
• Langsame Form (seltener, die Symptome treten über einen langen Zeitraum einzeln auf und enden mit dem Tod des Patienten).

Die Erstinfektion mit dem Epstein-Barr-Virus erfolgt vor allem im Kindes- und Jugendalter. Der Inzidenzgipfel liegt zwischen dem 14. und 18. Lebensjahr.

Es gibt drei verschiedene Formen einer primären Virusinfektion:

• asymptomatisch (keine klinischen Manifestationen),
• Atemwege (Symptome einer Atemwegsinfektion: Fieber, Nasenausfluss, allgemeine Schwäche usw.),
• Infektiöse Mononukleose mit drei Hauptsymptomen: hohes Fieber, Anzeichen von Halsschmerzen mit gelblichen Krusten auf den Mandeln, Vergrößerung von Organen wie Leber und Milz; es kommt zu einer Erhöhung der Leukozytenzahl und einer Vergrößerung der Lymphknoten.

Um aus der akuten Phase der Erkrankung herauszukommen, gibt es mehrere Möglichkeiten:

• vollständige Genesung,
• die Krankheitssymptome verschwinden, das Virus jedoch im Körper verbleibt und sich weiterentwickelt, ohne dass es dabei zu spürbaren Veränderungen der Zellen kommt (Trägerzustand),
• es gibt keine Krankheitssymptome, das Virus verlässt den Körper nicht, zeigt aber auch wenig Aktivität (latente Form),
• Reaktivierung des Virus aus einer latenten Form,
• chronischer Infektionsverlauf (mit Krankheitsrückfällen, chronisch aktive Form, generalisiert mit Schädigung von Organen und Körpersystemen).

Die Folgen eines längeren Aufenthalts des Virus im Körper können sein:

• Chronische Form der infektiösen Mononukleose.
• Hämatophagozytisches Syndrom: stabiles Fieber, verminderte Blutbestandteile (erhöhte Gerinnungsfähigkeit), vergrößerte Leber und Milz, Schleimhautblutungen, Gelbsucht (aufgrund einer Leberfunktionsstörung), vergrößerte Lymphknoten, neurologische Symptome.
• Latente Form mit Entwicklung einer sekundären Immunschwäche: Hyperthermie über einen längeren Zeitraum, allgemeine Schwäche, Vergrößerung und Schmerzen der Lymphknoten, Muskel- und Gelenkschmerzen, häufige Infektionskrankheiten.
• Entwicklung von Autoimmunerkrankungen in Form von Lupus erythematodes, rheumatoider Arthritis usw.
• Erscheinungsformen des chronischen Erschöpfungssyndroms mit Verschlechterung des Allgemeinbefindens und der Leistungsfähigkeit.
• Generalisierte Form einer chronischen Infektion mit Schädigungen des zentralen Nervensystems, des Herzmuskels, der Nieren, der Leber und der Lunge.
• Entwicklung onkologischer Erkrankungen (lymphozytische Leukämie und Lymphome), bei denen eine pathologische Zunahme der Anzahl von Zellen des Lymphsystems beobachtet wird. Das Herpesvirus Typ 4 zerstört keine Trägerzellen, sondern zwingt sie zur aktiven Vermehrung, wodurch Neoplasien aus lymphatischem Gewebe nachgewiesen werden.

Wie wir sehen, ist das Epstein-Barr-Virus nicht so harmlos, wie es auf den ersten Blick scheint, weshalb man nicht leichtfertig damit umgehen sollte. Darüber hinaus ist das Herpesvirus Typ 4 durch häufige Episoden der Virusbeladung und der latenten Form gekennzeichnet, ganz zu schweigen von verschiedenen Formen chronischer Infektionen, bei denen eine Person unbewusst eine Infektionsquelle bleibt.

In diesem Fall kann das Vorhandensein eines Infektionserregers im Körper nur durch eine spezielle Analyse auf das Epstein-Barr-Virus festgestellt werden, wobei das Biomaterial hierfür in der Regel Blut ist.

Hinweise für das Verfahren Epstein-Barr-Virus-Test.

Da eine Herpesvirusinfektion Typ 4 manchmal nicht so leicht zu erkennen ist, besteht nicht immer ein Verdacht darauf. Es gibt jedoch bestimmte Anzeichen, anhand derer ein Arzt das Vorhandensein des Virus im Körper vermuten kann:

• stark geschwächtes Immunsystem (Risikopatienten sind HIV-infizierte Patienten mit AIDS, Patienten nach Organtransplantation oder Chemotherapie),
• Vergrößerung der regionalen Lymphknoten im Kinn- und Hinterkopfbereich und deren Schmerzen, insbesondere wenn dies nach einer Bluttransfusion oder Organtransplantation von einem Spender beobachtet wird.
• akute respiratorische Virusinfektion (ARVI), die vor dem Hintergrund sehr hoher Temperaturen (38-40 Grad) auftritt,
• das Auftreten von Anzeichen einer infektiösen Mononukleose, die am häufigsten unter dem Einfluss des Epstein-Barr-Virus auftritt.

Auch wenn eine Person die oben genannten Symptome nicht aufweist, kann ein Facharzt aufgrund einiger Ergebnisse von Routineuntersuchungen (allgemeine Blutanalyse und Biochemie) sowie Untersuchungen zum Immunstatus einen Verdacht hegen.

Ein großes Blutbild auf das Epstein-Barr-Virus kann Folgendes zeigen:

• Zunahme der Lymphozytenzahl,
• niedriger Hämoglobinwert, der auf eine Abnahme der roten Blutkörperchen hinweist,
• erhöhte Blutgerinnung aufgrund einer großen Anzahl von Blutplättchen,
• das Auftreten von Virozyten (atypische Lymphozyten mit ähnlicher Struktur wie Monozyten).

Eine biochemische Blutuntersuchung, die Aufschluss über den Zustand der inneren Organe gibt, zeigt Veränderungen der Leber- und Milzfunktion.

Ein Immunassay für EBV kann eine Veränderung der Anzahl spezifischer Lymphozyten, eine Diskrepanz in der Anzahl von Immunglobulinen verschiedener Klassen (Dysimmunglobulinämie) und einen Mangel an Immunglobulin G zeigen, was auf ein schwaches Immunsystem und seine Unfähigkeit hinweist, den Ansturm des Virus einzudämmen.

Solche Ergebnisse unspezifischer Analysen können Ärzte alarmieren, aber es ist immer noch unmöglich, genau zu sagen, womit sie es zu tun haben. Alles bleibt im Stadium der Annahmen und vorläufigen Diagnose. In den meisten Fällen vermuten Ärzte eine latente Form einer infektiösen Mononukleose, obwohl sich andere virale Pathologien (Grippe, Hepatitis usw.) auf die gleiche Weise manifestieren können.

Aufgrund der hohen Prävalenz von Hepatitis Typ 4 und der Möglichkeit ihrer Übertragung von der Mutter auf das Kind ist der Epstein-Barr-Virustest auch bei der Planung einer Schwangerschaft hilfreich. Wenn die Mutter bereits an der Infektion litt, hat ihr Körper Antikörper dagegen gebildet. Eine erneute Infektion ist aufgrund der Bildung einer starken Immunität in der Regel ausgeschlossen, und falls sie dennoch auftritt, hat sie nicht mehr die Folgen, die bei der ersten Begegnung mit dem Virus möglich sind. Die Immunität hemmt die Aktivität des Virus lebenslang, obwohl das Virus selbst wie jedes Herpesvirus im Körper verbleibt.

Infiziert sich die werdende Mutter während der Schwangerschaft mit dem Herpesvirus, kann es zu Fehl- und Frühgeburten kommen oder das Virus beeinträchtigt die intrauterine Entwicklung des Babys.

Ein Onkologe kann einen EBV-Test anordnen, wenn der Verdacht auf ein Burkett-Lymphom besteht oder um Tumorprozesse bei Menschen mit HIV zu diagnostizieren. Ein Therapeut kann diesen Test zur Diagnose von Herpesinfektionen einsetzen (Differentialdiagnostik zur Bestimmung des Virustyps). Manchmal wird der Test auch eingesetzt, um die Wirksamkeit einer Behandlung zu beurteilen.

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Vorbereitung

Je nach Art der Untersuchung kann das Biomaterial dafür Blut, Speichel, Urin, Auswurf, Fruchtwasserprobe, Abstrich aus dem Gebärmutterhalskanal oder der Harnröhre sowie Liquor cerebrospinalis (CSF) sein. Am häufigsten greifen Ärzte auf Blutuntersuchungen zurück, die als die aussagekräftigsten gelten.

Es ist klar, dass einige Faktoren die Qualität und Quantität des Biomaterials negativ beeinflussen können. Daher lohnt es sich, am Vortag bestimmte Regeln zu beachten:

• Es wird empfohlen, alle Untersuchungen (insbesondere Blutuntersuchungen) morgens auf nüchternen Magen durchzuführen. Die letzte Mahlzeit sollte spätestens 12 Stunden vor der Blutentnahme eingenommen werden. Daher ist es besser, zum Abendessen Wasser zu trinken.
• Das am besten geeignete Material für die Analyse des Epstein-Barr-Virus ist venöses Blut. Vor der Blutspende aus einer Vene wird immer eine 15-minütige Pause empfohlen, wenn eine Person gerade im Labor angekommen ist.
• Um eine folgenfreie Blutentnahme und ein zuverlässiges Testergebnis zu gewährleisten, wird empfohlen, innerhalb von 12 Stunden vor dem Eingriff keine aktive körperliche Arbeit oder Sport zu verrichten, keinen Alkohol zu trinken oder zu rauchen.
• Die Ergebnisse der Tests können auch durch die Einnahme von Medikamenten beeinflusst werden. Sie sollten die Einnahme von Medikamenten mindestens zwei Tage vor dem Test beenden. Ist dies nicht möglich, müssen Sie die Laborschwester über Ihre Medikamenteneinnahme informieren.
• Während der Schwangerschaft wird vor dem Test auf EBV ein Test auf Toxoplasmose durchgeführt, um eine falsch positive Reaktion auszuschließen.
• Wird bei einem Kind unter 5 Jahren ein Bluttest auf das Epstein-Barr-Virus durchgeführt, sollte dem Kind eine halbe Stunde vor dem Eingriff reichlich abgekochtes Wasser in relativ kleinen Portionen zu trinken gegeben werden.

Wenn ein anderes Biomaterial zur Analyse entnommen wird, müssen Sie vorab alle Nuancen der Vorbereitung auf die Analyse in Abhängigkeit vom verwendeten Material mit Ihrem Arzt klären.

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Technik Epstein-Barr-Virus-Test.

Ärzte messen spezifischen Tests, die helfen, die DNA des Virus oder spezifische Antikörper im Biomaterial des Patienten zu identifizieren, eine wichtige Rolle bei der Diagnose von Herpes Typ 4 und infektiöser Mononukleose bei. Zu den wichtigsten Labortests zum Nachweis des Epstein-Barr-Virus im menschlichen Körper gehören der Enzymimmunoassay (ELISA) und die PCR-Diagnostik. Schauen wir uns das Wesentliche beider Methoden und die Besonderheiten ihrer Umsetzung genauer an.

EBV-Enzymimmunoassay

ELISA ist eine Untersuchung (Analyse) des venösen Blutes von Patienten auf Antikörper gegen das Epstein-Barr-Virus. Als Ergebnis der Diagnostik werden im Blut von Patienten mit EBV Immunglobuline vom Typ IgG oder IgM (insgesamt gibt es 5 Typen) gegen eines der 3 Antigene des Virus (früh, Kapsid oder Kern) nachgewiesen.

Die Analyse erfolgt in einem immunologischen Labor, wo dem Patienten etwa 10 ml Blut aus der Vene entnommen werden. Das Biomaterial wird anschließend eine Viertelstunde bei Raumtemperatur belassen, während der das Blut gerinnt. Das Gerinnsel wird sorgfältig vom flüssigen Anteil getrennt. Die Flüssigkeit wird zentrifugiert und reines Blutserum gewonnen. Dieses wird einer weiteren Untersuchung unterzogen.

Die Idee zu dieser Methode entstand auf der Grundlage von Daten, dass unser Körper spezifische Antikörper gegen jede Art von Viren und Bakterien produziert, die von außen in den Körper eindringen. Der Körper erkennt sie als Fremdkörper und zerstört sie mithilfe einzigartiger Antikörper, die fest am Antigen haften.

Das Wesentliche der ELISA-Analyse basiert auf dieser Reaktion. Antikörper mit daran befestigten Markierungen verbinden sich mit Antigenen. Auf die Markierungen wird eine Substanz aufgetragen, die bei Reaktion mit einem speziellen Enzym die Farbe der Probe verändert. Je mehr solcher „Ketten“ vorhanden sind, desto intensiver ist die Farbe des Biomaterials.

Enzymimmunoassays können mit drei Methoden durchgeführt werden:

• Direkter ELISA. Die Testflüssigkeit wird in die Vertiefungen gegeben und etwa eine halbe Stunde stehen gelassen, damit die Antigene an den Wänden haften können. Den sorbierten Antigenen wird Flüssigkeit mit markierten Antikörpern zugesetzt. Nach der erforderlichen Zeit (von einer halben Stunde bis zu fünf Stunden), wenn die Antikörper die Antigene nachgewiesen und an sie gebunden haben, wird die Flüssigkeit abgelassen, die Vertiefungen sorgfältig gespült und das Enzym hinzugefügt. Die Viruskonzentration in einer Blutkonserve wird mittels Färbung bestimmt.
• Indirekter ELISA. Bei dieser Methode werden das zu testende Blutserum und markierte Antikörper zu den an der Oberfläche der Vertiefungen sorbierten Antigenen hinzugefügt. Dadurch entstehen zwei Arten von Liganden, von denen einige markiert sind. Das Ergebnis hängt von der Antigenkonzentration in der zu testenden Probe ab. Je mehr unmarkierte Antikörper vorhanden sind, desto weniger Verbindungen werden vom Enzym markiert.

Anschließend wird der gewaschenen Zusammensetzung ein spezielles Reagenz zugesetzt, mit dem die enzymatische Aktivität der Antigen-Antikörper-Komplexe bestimmt wird.

• "Sandwich". Unterscheidet sich von der indirekten Methode dadurch, dass zunächst keine Antigene, sondern Antikörper an der Oberfläche sorbiert werden. Dazu wird eine Lösung mit den zu untersuchenden Antigenen gegeben. Nach dem Waschen des Trägers werden Antikörper mit enzymatischen Markierungen hinzugefügt. Überschüssige Antikörper werden wieder entfernt und mit Wasserstoffperoxid eine farbige Substanz gewonnen, die spektrometrisch untersucht wird.

Diese Art der Analyse ermöglicht nicht nur die Identifizierung spezifischer Antikörper und die Bestimmung der Antigenkonzentration, sondern auch die Klärung des Krankheitsstadiums. Tatsache ist, dass unterschiedliche Antigene des Epstein-Barr-Virus in verschiedenen Stadien der Herpesinfektion auftreten, was bedeutet, dass in einem bestimmten Krankheitszeitraum Antikörper gegen sie produziert werden.

So treten IgG-Antikörper gegen das frühe Antigen (IgG EA) 1–2 Wochen nach der Infektion im Blut auf, wenn sich die Krankheit im akuten Stadium oder im Stadium der Virusreaktivierung befindet. Immunglobuline dieses Typs verschwinden nach 3–6 Monaten. Im chronischen Verlauf einer Virusinfektion sind solche Antikörper besonders zahlreich, bei der atypischen Form fehlen sie vollständig.

IgG-Antikörper gegen das Kapsidantigen (IgG VCA) treten ebenfalls früh, in den ersten vier Wochen der Erkrankung, auf, ihre größte Anzahl wird jedoch im zweiten Infektionsmonat festgestellt. In der akuten Phase finden sich sie bei den meisten Patienten, bei Kindern jedoch möglicherweise nicht. Im chronischen Krankheitsverlauf, insbesondere während der Virusreaktivierung, ist die Menge an IgG VCA besonders hoch. Diese Antikörper verbleiben wie das Virus selbst dauerhaft im menschlichen Blut, was auf eine gebildete Immunität gegen den Infektionserreger hinweist.

IgM-Antikörper gegen Kapsidantigen (IgM VCA) können bereits vor den ersten Krankheitssymptomen auftreten. Ihre Konzentration (Titer) ist in den ersten sechs Krankheitswochen besonders hoch. Dieser Antikörpertyp ist charakteristisch für eine akute Infektion und die Reaktivierung einer chronischen Infektion. IgM VCA verschwinden nach 1–6 Monaten.

IgG-Antikörper gegen das Kerngen (IgG EBNA) können auf eine frühere direkte Herpesinfektion hinweisen. In der akuten Phase der Erkrankung sind sie äußerst selten und treten meist in der Rekonvaleszenz (im 3.–10. Monat) auf. Sie können noch Jahre nach der Infektion im Blut nachgewiesen werden.

Der Nachweis einzelner Antigene liefert kein vollständiges Bild der Erkrankung, daher sollten Tests auf verschiedene Antikörper gemeinsam durchgeführt werden. Ist beispielsweise nur IgM VCA vorhanden, IgG EBNA jedoch nicht nachweisbar, handelt es sich um eine Primärinfektion.

Leider reicht ein Enzymimmunoassay oft nicht aus, um eine primäre Herpesinfektion oder angeborene Pathologie nachzuweisen. Im letzteren Fall können Antikörper möglicherweise überhaupt nicht nachgewiesen werden. Zur Bestätigung der Primärerkrankung wird eine molekulare Untersuchung von Blut oder anderem biologischen Material auf das Epstein-Barr-Virus durchgeführt.

PRC-Analyse auf Epstein-Barr-Virus

Diese Analyse wird im Stadium einer akuten Primärinfektion durchgeführt, da sonst das Ergebnis falsch ist.

Das Wesentliche der PCR-Methode (Polydimensionale Kettenreaktion) besteht darin, dass jeder Infektionserreger seinen eigenen Satz von Genen in einem DNA-Molekül enthält. Die DNA des Erregers ist in geringen Mengen im für die Forschung entnommenen Biomaterial enthalten (die Viren selbst sind mikroskopisch klein), daher ist eine Beurteilung der Situation sehr schwierig. Führt man jedoch eine spezifische Reaktion durch, erhöht sich die Menge an genetischem Material deutlich, was die Benennung des Erregers ermöglicht.

Mit Einweginstrumenten wird Material für die molekulare Forschung entnommen und zur Analyse in ein spezielles Gerät gegeben. Das Gerät ist ein Thermostat mit einem speziellen Programm – ein Thermocycler oder Verstärker. Das Gerät führt mehrere Dutzend Mal (ca. 2-3 Minuten) einen vollständigen PRC-Zyklus durch, der drei Phasen umfasst:

• Denaturierung (bei einer Temperatur von 95 Grad werden DNA-Stränge getrennt).
• Annealing (bei einer Temperatur von 75 Grad werden speziell vorbereitete „Primer“ für EBV in das Untersuchungsmaterial eingebracht, die sich an die DNA des Virus heften).
• Erweiterung bzw. Vervielfältigung des Erbguts (dem Samen wird bei einer Temperatur von 72 Grad ein spezielles Enzym zugesetzt, das eine neue DNA-Kette aufbaut und so die Menge des Erbguts verdoppelt).

Wenn der vollständige Zyklus der polydimensionalen Reaktion 50 Mal durchlaufen wird, erhöht sich die Materialmenge um das Hundertfache. Dies bedeutet, dass die Identifizierung des Erregers wesentlich einfacher wird.

Epstein-Barr-Virus-Test für ein Kind

Wie wir bereits wissen, kann das Epstein-Barr-Virus die Entstehung vieler Krankheiten verursachen. Sobald es in den menschlichen Körper eindringt, bleibt es dort dauerhaft, und nur die gut koordinierte Arbeit des Immunsystems verhindert, dass es aktiv in Zellen parasitiert.

Fast 95 % der erwachsenen Weltbevölkerung leben mit EBV in ihrem Inneren, und die meisten von ihnen wurden bereits in der frühen Kindheit mit dem Virus bekannt. Manche haben es von ihrer Mutter geerbt, andere bekamen das Virus von Eltern und Verwandten, die ihr Kind mit Küssen bedrängten, oder durch Tröpfcheninfektion im Kindergarten oder in der Schule (Infektionskrankheiten nehmen dort meist „universelle“ Ausmaße an).

Kleine Kinder neigen generell dazu, alles in den Mund zu nehmen, und die meisten Virionen finden sich im Speichel. Und wenn im Kindergarten mehrere Kinder am selben Spielzeug lecken, während die Erzieherinnen mit ihren eigenen Angelegenheiten beschäftigt sind, ist es nicht verwunderlich, dass sich das Virus in großen Kindergruppen so aktiv verbreitet.

EBV kann man getrost als eine Erkrankung von Kindern und Jugendlichen bezeichnen, da bereits im Jugendalter die Hälfte der Kinder das Virus in sich trägt (und mit 30 Jahren etwa 90 % der Erwachsenen). Kinder unterschiedlichen Alters erkranken auf ihre Weise. Bis zu einem Jahr, wenn das Kind nicht aktiv mit anderen kommuniziert, ist die Wahrscheinlichkeit einer Erkrankung gering. Ein Kind über einem Jahr, auch wenn es noch nicht im Kindergarten ist, wird geselliger, spielt mit Gleichaltrigen auf der Straße, unternimmt mit seiner Mutter aktive Einkaufstouren usw., und die Wahrscheinlichkeit, sich mit dem Virus anzustecken, steigt deutlich.

Dies ist jedoch kein Grund, das Kind in vier Wänden einzusperren. Im Alter von 1–3 Jahren verläuft die Krankheit in den allermeisten Fällen symptomfrei, außer vielleicht mit einem leichten Temperaturanstieg und einer leicht laufenden Nase, die an eine Erkältung erinnert. Es stellt sich heraus, dass die Bekanntschaft mit dem Virus umso einfacher verläuft, je früher das Kind mit dem Virus in Berührung kommt.

Es ist nicht gut, wenn ein Kind erkrankt, ohne dass IgG-VCA-Antikörper im Blut vorhanden sind. Dies kann darauf hinweisen, dass keine Immunität gegen das Virus aufgebaut wurde und eine Reaktivierung des Virus möglich ist, sobald das Immunsystem geschwächt ist. Der Grund dafür ist höchstwahrscheinlich die Unvollkommenheit des Immunsystems von Kleinkindern, das sich über mehrere Jahre entwickelt.

Das Schulleben bietet noch mehr Voraussetzungen für die Erkrankung, insbesondere in der Adoleszenz, wenn junge Menschen aktiv Küssen üben. Bei Kindern über 3 Jahren verläuft die Krankheit jedoch seltener asymptomatisch. In den meisten Fällen begegnen Ärzte der infektiösen Mononukleose mit ihren charakteristischen Symptomen.

Obwohl die Krankheit einen langen Verlauf (etwa 2 Monate) haben kann, ist sie nicht so gefährlich und erfordert keine ernsthaften Medikamente. Ärzte verschreiben entzündungshemmende und antivirale Medikamente. Kommt eine bakterielle Infektion hinzu, greifen sie zu Antibiotika. Penicilline werden in diesem Fall übrigens nicht empfohlen, da sie Hautausschläge hervorrufen können.

Wenn ein Kind oder Jugendlicher an infektiöser Mononukleose erkrankt, bedeutet das nicht automatisch, dass sich das Epstein-Barr-Virus in seinem Körper eingenistet hat. Die Krankheit wird von anderen, weniger verbreiteten Erregern wie dem Cytomegalievirus (Herpesvirus Typ 5) verursacht. Um herauszufinden, womit sie es zu tun haben, verschreiben Ärzte einen Epstein-Barr-Virustest und gegebenenfalls weitere Laboruntersuchungen.

Richtig ist auch, dass die infektiöse Mononukleose nicht die einzige Manifestation von EBV im Kindesalter ist. Zwar gibt es noch weitere Erkrankungen, die mit diesem Erreger assoziiert sind, in unserer Region sind diese jedoch selten.

So tritt das Burkitt-Lymphom (dem EBV seine Entdeckung verdankt) vor allem bei Kindern in afrikanischen Ländern auf, sehr selten in Amerika und noch seltener in Europa (und dann nur vor dem Hintergrund von AIDS). Ein Kiefertumor mit Schädigung der Lymphknoten, Nieren und anderer Organe findet sich bei Kindern im Alter von 3-8 Jahren.

Nasopharynxkarzinome, ein erheblicher Anteil anderer Lymphome, Haarleukoplakie der Mundhöhle – all dies sind Manifestationen von EBV vor dem Hintergrund einer stark reduzierten Immunität, die bei einer HIV-Infektion und deren Spätstadium AIDS auftritt.

Angeborene Immunschwäche und die Hinzufügung des Epstein-Barr-Virus sind eine gefährliche Mischung, die bei einem Kind zur Entwicklung eines proliferativen Syndroms führen kann. In diesem Fall führt eine Zunahme der B-Lymphozyten zum Auftreten von Granula in vielen Organen, was deren normale Funktion beeinträchtigt. Dies ist eine Krankheit mit einer hohen Sterblichkeitsrate, die sich jedoch nicht vor dem Hintergrund einer normalen Immunität entwickelt.

Man kann sagen, dass das Epstein-Barr-Virus im Kindesalter vor allem bei Immunschwäche aufgrund der Entwicklung verschiedener Komplikationen gefährlich ist. In den meisten Fällen beschränkt sich alles auf eine infektiöse Mononukleose. Und obwohl keine spezielle Behandlung erforderlich ist, ziehen es Ärzte dennoch vor, die Art des Erregers festzustellen, wofür dem Kind ein allgemeiner Bluttest, ein Enzymimmunoassay und eine PCR verschrieben werden.

Da die Primärinfektion überwiegend im Kindesalter auftritt, kann man sich durchaus auf ein großes Blutbild und eine PCR beschränken, die bei der Erstdiagnose der Erkrankung recht aussagekräftig sind.

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Normale Leistung

Die Ergebnisse der PCR-Analyse werden mittels Elektrophorese oder mit markierten Primern ausgewertet. Im letzteren Fall genügt die Zugabe eines Reagenzes (Chromogen) und die Farbbestimmung, ob Virionen in der Probe vorhanden sind. Ein positives Ergebnis der Elektrophorese liegt vor, wenn in der untersuchten Probe DNA-Stränge unterschiedlicher Länge nachgewiesen werden.

Während der Inkubationszeit der Krankheit und bei asymptomatischem Virustransport ist die PCR negativ, ebenso wie bei völliger Abwesenheit des Virus im Körper. Zu Beginn der Entwicklung der Primärinfektion und in deren frühen Stadien kann die Echtzeit-PCR sowohl positive als auch negative Ergebnisse liefern, was die Situation jedoch nicht weiter klärt.

Inmitten der Krankheit (akute Phase), im chronischen Verlauf oder bei einer Reaktivierung des Virus (Exazerbation) sowie bei atypischen Formen ist die Analyse jedoch positiv. Wenn eine Person schon lange krank ist und sich das Virus in ihrem Körper in einem inaktiven Zustand befindet, liefert die PCR-Analyse ein negatives Ergebnis. Das heißt, die Durchführung dieser Analyse während dieser Zeit sowie in zu frühen Stadien der Krankheit ist ebenfalls ungeeignet.

Es muss gesagt werden, dass genaue Ergebnisse dieser Art von Laborforschung nur im Falle einer Primärinfektion und der Abwesenheit von Virionen anderer Viren möglich sind.

Nun zum Enzymimmunoassay für das Epstein-Barr-Virus. Hier gelten die gleichen Anforderungen. Das Vorhandensein von Herpesviren Typ 5 oder 6, Toxoplasmose und einer HIV-Infektion im Körper kann das Ergebnis ebenso verfälschen wie eine nachlässige Analyse oder die schlechte Qualität der verwendeten Reagenzien. In diesem Fall können zusätzliche Untersuchungen unter Berücksichtigung möglicher Krankheitserreger erforderlich sein.

Normale Testergebnisse, die das Fehlen des Virus im Körper anzeigen, gelten als negatives Ergebnis für alle vier Tests: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA und IgG EBNA. Ja, jeder Test wird separat durchgeführt, da Antigene in unterschiedlichen Krankheitsphasen auftreten. Manchmal können nur einzelne Tests vorgeschrieben sein, in den meisten Fällen müssen jedoch alle vier Tests durchgeführt werden, allerdings zu unterschiedlichen Zeitpunkten der Krankheit.

Beispielsweise wird während der Inkubationszeit der Krankheit sowie in Abwesenheit einer Infektion keiner der vier Antikörpertypen im Blut nachgewiesen. Ein solches Ergebnis kann nicht als ausreichend angesehen werden, da es keine Unterscheidung zwischen einer Person, die zum ersten Mal erkrankt ist, und einer gesunden Person ermöglicht.

Zu Beginn der Entwicklung der Primärerkrankung treten im Blut nur IgM-VCA-Antikörper auf. In den frühen Stadien der Erkrankung gesellen sich IgG-VCA-Antikörper dazu.

Im akuten Stadium der Primärinfektion bilden sich drei Antikörpertypen: IgG VCA, IgM VCA und IgG EA, wobei die meisten IgG-Antikörper gegen das Kapsidantigen nachgewiesen werden. Die gleiche Antikörperzusammensetzung bleibt auch sechs Monate nach der akuten Phase der Erkrankung erhalten, die Menge an IgM VCA sinkt jedoch allmählich auf Null.

Sechs Monate nach der Erkrankung treten IgG-EBNA-Antikörper im Blut auf, während IgG-EA-Immunglobuline immer weniger werden und IgM-VCA vollständig fehlen.

Bei chronischen Krankheitsverläufen oder einer Reaktivierung des Virus können unterschiedliche Anzeichen vorliegen. Meistens finden sich alle vier Antikörpertypen im Blut. Es kann jedoch durchaus sein, dass die Immunglobuline IgM VCA und IgG EBNA nicht nachgewiesen werden.

Eine Komplikation einer Virusinfektion durch Tumorprozesse tritt auf, wenn IgM-VCA-Antikörper fehlen, und IgG-EBNA-Immunglobuline werden nicht in allen Fällen nachgewiesen.

Ein Enzymimmunoassay bestimmt jedoch nicht nur das Vorhandensein bestimmter Antikörper, sondern auch deren Konzentration, was eine genauere Beurteilung des Krankheitsstadiums und seiner möglichen Folgen ermöglicht. Konkrete Zahlen sind hier nicht erforderlich. Jedes Labor führt die Analyse auf eine der verschiedenen Arten und unter Verwendung unterschiedlicher Reagenzien durch, sodass die Ergebnisse der Analysen verschiedener Labore im digitalen Format unterschiedlich ausfallen können.

Der Patient erhält ein Formular mit den Grenzwerten (Referenzwerten). Liegt das Ergebnis unter dem Grenzwert, gilt es als normal (negativ). Liegt der ermittelte Wert über dem Referenzwert, deutet alles auf ein positives Ergebnis hin, was bedeutet, dass das Virus im Körper lebt. Der ermittelte Wert gibt Aufschluss über das Stadium der Erkrankung und die Besiedlung des Körpers mit EBV-Virionen, also über den Schweregrad der Erkrankung.

Ein negativer ELISA-Test bedeutet lediglich, dass die Person in der Vergangenheit keinen Kontakt mit EBV hatte. Es lässt sich jedoch nicht mit Sicherheit sagen, ob das Virus aktuell im Körper vorhanden ist. Ein negatives Ergebnis kann durch die Inkubation des Erregers im Körper und eine asymptomatische Virusbesiedlung verursacht werden. Um sicherzustellen, dass der Körper nicht vom Virus besiedelt ist, ist manchmal nach einiger Zeit eine zweite Testreihe erforderlich.

Liegt das Ergebnis des Epstein-Barr-Virus-ELISA nur geringfügig über den Referenzwerten, gilt das Ergebnis als fraglich. Die Ursache liegt meist im Frühstadium der Erkrankung oder im Vorhandensein von Virionen eines anderen Virus im Körper. In diesem Fall empfiehlt sich nach zwei Wochen ein Wiederholungstest auf EBV und ggf. weitere Erreger.

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Was die Dauer eines Epstein-Barr-Virus-Tests und die voraussichtlichen Ergebnisse betrifft, sind keine besonderen Schwierigkeiten zu erwarten. In einem seriösen, gut ausgestatteten Labor beträgt die Wartezeit nach Einreichung des Biomaterials maximal zwei Tage. In dringenden Fällen kann die Antwort auch nach wenigen Stunden vorliegen.

Der Epstein-Barr-Virustest sollte in einem vertrauenswürdigen Labor durchgeführt werden, das über hochwertige Reagenzien und qualifizierte Fachkräfte verfügt. Schließlich kostet der Test Geld (und zwar nicht wenig, der Test auf einen Antikörpertyp kostet etwa 150-170 UAH), und ich möchte kein falsches Ergebnis erhalten und mich dann möglicherweise erneut an ein anderes Labor wenden, um den Test zu wiederholen.

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